Lee，M.K .;rai，p .;威廉姆斯，j ;;Tweg，R. J .;Moerner，W. E.J.IM。化学。SOC。2014年,136, 14003 - 14006
DOI:10.1021 / JA508028H.
细胞表面的精确成像fl荧光标记的细菌需要超分辨率的方法，因为这些细胞的大小与二氮化镓的大小相同ff纤维体积含量的限制。本文提出了一种无毒、特异的光控小分子罗丹明螺内酯发射体fic细胞外表面的三维(3D)超分辨率(SR)成像标记。常规罗丹明螺-内酰胺在紫外光下光开关到发光形式;然而，这些波长会损害细胞。我们通过迭代合成和光谱表征将光开关扩展到可见波长>400 nm，以优化螺内酯的取代。此外,一个N-羟基琥珀酰亚胺功能化衍生物使胺在活性表面的共价标记成为可能Caulobacter Crescentus细胞。结果，三维SR重建的标记细胞表面显示均匀和特异性fiC采样，每个单元数千个定位，定位精度高x,y， 和z．细胞柄长度的分布ff分配尺寸的蜂窝结构）是量子fi用于混合细胞群。脉冲追逐实验标识fi细胞表面生长部位。用优化的罗丹明螺内酰胺标记提供了一种高特异性研究活细胞表面的通用策略fi城市和分辨率降至10−20纳米。
介绍
所谓的超分辨率技术已经成为显微镜和生物相关领域不可或缺的技术。[1]虽然各种纳米方法如STED、PALM和RESOLFT已经在许多领域进行了实践，但标记染料仍然是有限的。光致变色罗丹明在棕榈型和ted型超分辨技术中都是很有前途的染料。然而，几乎所有的罗丹明，包括相对光致变色衍生物，都因其无法通过可见光的交替辐射从非荧光状态切换到荧光状态而受到影响。[２]
在这里,莫纳尔谁是2014年诺贝尔化学奖的冠军，他的斯坦福大学和他的同事改善了古典电影罗丹明的光物理性质和超级分辨率显微镜的满意要求。
分子设计
对于光致变色的罗丹明，在二元州之间是易易且互连的，作者将各种芳族基团引入内酯部分。手机金沙网址结果，引入正向带电斯莱基唑鎓使得开环形式的吸收区域，无荧光状态，重叠405nm，因此满足最坚韧但重要的要求之一。
3D超分辨率图像
将应用最广泛的活性生物标签n -羟基琥珀酰亚胺引入合成的罗丹明中。染色后发现，这些染料局限并结合在细胞表面。然后，利用PALM方法从光致变色罗丹明的离散单分子图像重建三维图像。
参考
（1）“在纳米分辨率下成像细胞内荧光蛋白”
betzig，e .;帕特森，G.H。Sougrat，R。Lindwasser，O. W .;olenych，s .;Bonifacino，J.S ;;戴维森，M. W .;Lippincott-Schwartz，J。Hess，H. F.科学2006年,313., 1642−1645。DOI:10.1126 / Science.1127344
（2）“光致变色菱胺提供纳米镜，具有光学选择”
Fölling，j;Belov，V。;kunetsky，r。Medda，R。Schönle，a。Egner，a .;Bossi，M .;地狱，S. W.angew。化学。，int。艾德。2007年,46，6266-6270。DOI:10.1002 / anie.200702167